拆装管路、泵头、检测器必须先停泵、泄压、关闭光源;
缓冲盐体系必须开启柱塞自动冲洗套件,禁止盐溶液长期滞留泵头;
所有流动相使用前超声脱气 10min 并过滤;
废液桶实时监控,液面不超过 70%,防止倒吸污染检测器;
含水溶剂瓶避光存放,每周更换,避免滋生微生物堵塞管路。
降低流速至 0.2mL/min,切换通道为纯水,冲洗系统 30min,冲净管路、泵头、定量环、色谱柱内缓冲盐;
更换 10% 甲醇水冲洗 20min;
切换纯甲醇冲洗泵、自动进样流路、流通池 20min;
卸下色谱柱,两端拧紧原装堵头保存;无卸柱需求则保持甲醇封存管路;
停泵,关闭检测器氘灯,最后关闭主机电源。
泵压力曲线:基线平稳无周期性波动,无持续上升 / 下降;
整机检漏:泵头、单向阀、进样阀、流通池所有接头无渗漏;
柱塞冲洗液:10% 异丙醇水溶液液面充足,无浑浊、无长菌;
自动进样洗针液:及时补充,废液管路通畅;
检测器基线:无大幅漂移、无持续杂峰;
溶剂瓶吸滤头无气泡、无堵塞。
更换柱塞冲洗套件内全部 10% 异丙醇清洗液;
拆下溶剂吸滤头,纯水超声 10min→异丙醇超声 10min,烘干装回;
执行整机排气操作,排空脱气机、泵内滞留气泡;
查看控制器柱塞密封累计输送体积,临近更换阈值提前备货。
拆卸进样针,甲醇超声清洗 10min,检查针体无弯曲、堵塞;
擦拭样品盘、针座、清洗通道,去除样品结晶残留;
执行 6 针标准品重复进样,峰面积 RSD≤0.5% 为合格,偏差大检修转子密封;
排空洗针废液管路,疏通堵塞。
低流速异丙醇冲洗流通池 10min,排出池内微小气泡;
擦拭柱温箱内部,清理残留溶剂污渍,确认温控风扇正常运转。
检查 PEEK 管路无裂纹、接头无滑丝;
更换溶剂瓶过滤滤膜,清理瓶底盐沉淀、微生物絮状物。
软件界面将柱塞缩回至拆卸位,泄压断电;
松开泵头固定螺丝,平稳取下泵头组件;
取出旧柱塞密封丢弃,无尘纸蘸异丙醇擦拭柱塞杆,去除盐结晶磨损碎屑;
新密封少量涂抹专用润滑脂,平稳装入泵头,对角均匀锁紧螺丝;
进出口单向阀拆解,纯水超声 10min + 异丙醇超声 10min,清理阀芯杂质;
装回单向阀、在线过滤白头,纯水低速冲洗泵头,检漏无渗漏再投入使用;
更换在线过滤白头,防止颗粒物划伤柱塞杆、堵塞管路。
LC-40 更换阈值:柱塞密封输送 60L 介质建议更换;高盐环境缩短至 30L。
断电冷却,拆卸进样转子组件;
更换转子垫圈、针座密封垫;
定量环用甲醇正向、反向交替冲洗,清除强保留样品;
组装后多次洗针,空白进样无杂峰、无拖尾污染为合格。
断开流通池进出口管路,拆下池体;
取出两侧光学透镜垫片,异丙醇超声 10min;
池体内部通道异丙醇超声 10min,去除吸附样品、盐沉淀;
垫片、透镜按原方向装回,螺丝轻拧不漏液即可,禁止过紧压裂光学镜片;
低速甲醇冲洗流通池,点灯观察基线平稳无毛刺。
标准物质进样,测定理论塔板数、分离度、拖尾因子;
柱压同比上升超 20%,用低流速纯甲醇反向冲洗柱头 30min;
柱效下降 10% 以上更换保护柱,分析柱按再生流程冲洗;
长期不用色谱柱充满 90% 甲醇密封避光常温存放。
流速校准:1mL/min 收集 10min 流动相,体积偏差≤2% 合格;
UV 检测器波长校准,波长误差≤2nm;
基线噪声、漂移测试,记录存档。
全套单向阀阀芯更换,消除压力周期性波动根源;
检查柱塞杆表面划痕、腐蚀,磨损严重同步更换柱塞杆;
统计氘灯累计点亮时长,达到 2000h 直接更换;更换后波长、基线重新校准;
脱气机四通道真空性能检测,真空度不足更换脱气膜;
所有老化 PEEK 管路、接头全部更换;
整机检漏:全系统加压至 40MPa 保压 10min,压降<0.5MPa 无泄漏;
系统适用性全套验证,留存标准色谱图台账。
泵内部传动、凸轮、轴承拆解清洁,加注专用润滑脂;
自动进样器传动导轨、齿轮除尘润滑;
检测器光学腔吹扫除尘,清洁光栅、反光镜;
柱温箱温控传感器精度校准;
全部易损件(密封、阀件、过滤耗材、光源)统一换新;
整机高压稳定性测试,高低流速梯度模拟实际生产方法连续运行 4h,压力、保留时间、峰面积重复性达标。
高盐流动相必须常开柱塞冲洗,冲洗液每日观察,浑浊当日更换;
禁止纯水长期做冲洗液,易滋生微生物,固定使用 10% 异丙醇水;
禁止超 60MPa 长期连续运行,加剧密封磨损;
梯度方法每日结束后,高有机相冲洗混合器,防止缓冲盐析出堵塞混合滤片。
高低浓度样品间隔插入甲醇空白洗针;
粘稠、蛋白、高盐样品进样后延长内外洗针时长;
样品瓶液面不可过低,防止吸空引入气泡造成进样误差;
转子密封为消耗品,累计进样 4 万次强制更换。
不用时必须关闭氘灯,延长光源寿命;
流通池严禁颗粒杂质进入,前置在线过滤器不可省略;
避免高浓度样品直接进池,易造成不可逆吸附污染;
长期不用,流通池充满甲醇封存,防止水分残留长菌。
全程配套保护柱,截留颗粒物、强保留杂质;
梯度程序结束后平衡 20 倍柱体积再下一针,保证保留时间稳定;
缓冲盐绝对不可留存柱内过夜;
反相 C18 柱禁止纯水长期封存,疏水相填料塌陷报废;
正相色谱柱使用正己烷等封存,禁止含水溶剂。
完整盐冲洗流程冲净全系统;
纯甲醇循环冲洗泵、进样器、流通池 60min;
色谱柱拆卸密封保存;
排空柱塞冲洗套件废液,更换全新 10% 异丙醇清洗液;
洗针液、废液全部清空;
关闭氘灯、各模块电源;溶剂瓶加盖避光;
复工前:纯水低速冲洗 30min,排气、检漏、标准品验证柱效与进样精度。
高温、高压状态下拆解泵头、流通池、单向阀;
缓冲盐不冲洗直接停机过夜,盐结晶划伤柱塞、堵塞管路;
裸手触碰柱塞杆、进样针、流通池光学镜片;
使用丙酮、强酸碱冲洗泵头与检测器流通池;
超量程 60MPa 长期运行超高效系统;
柱塞冲洗套件干涸无清洗液持续做含盐分析;
流动相不脱气、不过滤直接上机;
高压暴力拧紧泵头、流通池螺丝,造成镜片、密封不可逆损坏;
氘灯长期 24 小时不间断点亮。
泵压力周期性波动
原因:单向阀堵塞、柱塞密封磨损;处置:超声清洗单向阀,月度更换柱塞密封。
峰面积 RSD 偏大、进样重复性差
原因:进样针堵塞 / 弯曲、转子密封老化、定量环残留;处置:超声清洗进样针,更换转子垫圈。
基线持续漂移、杂峰多
原因:流通池污染、氘灯老化、管路残留样品;处置:拆解清洗流通池,校验光源,加长甲醇冲洗时长。
柱压异常飙升
原因:在线过滤白头堵塞、柱头筛板积颗粒、吸滤头堵塞;处置:更换过滤耗材,反向冲洗色谱柱。
泵头渗漏液体
原因:柱塞密封老化、泵头螺丝松紧不均;处置:全套更换柱塞密封,对角均匀锁紧泵头。
检测器无吸收信号、基线平直无响应
原因:氘灯寿命耗尽、流通池进气泡、光路污染;处置:更换氘灯,异丙醇冲洗排净气泡,吹扫光学腔。